Preparación de Medios de Cultivo: Una Guía Práctica de Laboratorio, Diapositivas de Anatomía

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PRACTICA No. 5

PREPARACIÓN DE MEDIOS DE CULTIVO

USO DE BALANZA DIGITAL, AUTOCLAVE, MECHERO E INCUBADORA

Etapa 2: Esterilización con autoclave del medio de cultivo

1. Quitar la tapa del autoclave y verter agua del grifo hasta la marca interna.
   2. Colocar la rejilla dentro del autoclave (^) 3. Subir el autoclave a su base metálica 4. Encender los mecheros para pre- calentar el autoclave. 5. Introducir los medios de cultivo encima de La rejilla interna (sin tocar el agua). 6. Tapar el autoclave con seguros. 7. Colocar válvula de alivio. 8. Una vez que el autoclave alcanza los siguientes parámetros:

• (^) Temperatura 121°C
• Presión 15 Lb. Comenzar a tomar el tiempo hasta completar 15 min. OJO: No exceder los 121°C pues el autoclave puede ESTRALLAR!!! 9. Transcurrido el tiempo apagar los mecheros y esperar a que la temperatura y presión marquen cero en el manómetro. 9. Destapar autoclave y sacar los medios de cultivo con cuidado pues están CALIENTES!! QFB. Lety Reyes

Etapa 3: Vaciado en placa de medios de cultivo (agares).

1. Dejar atemperar el medio de cultivo^2. Encender el mechero y trabajar dentro del cono de esterilidad. 3. Destapar el matraz cerca del mechero 4. Flamear la boca del mechero para asegurar su esterilidad. 2. Tener a la mano las cajas Petri ESTERILES ya rotuladas con el nombre del medio de cultivo.
   6. Abrir las cajas petri (^) 7. Vaciar aprox. 20 mL del medio de Cultivo en cada caja Petri. 8. Dejar gelar los medios. 9. Apilar las cajas Petri y envolver en papel estraza. Marcar con el núm de equipo, grado, grupo, turno y nombre del profesor responsable. 10. Meter los medios al refrigerador para su conservación. QFB. Lety Reyes