Medios de cultivo
TÉCNICAS BÁSICAS DE DIAGNÓSTICO EN MICROBIOLOGÍA:
ÁREA BACTERIOLOGÍA.
Bqco. Fernando J. Bobadilla 1
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medios de cultivo para microbiologia, Diapositivas de Microbiología
tecnicas basicas en microbiología
Tipo: Diapositivas
2018/2019
1 / 10
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Medios de cultivo
TÉCNICAS BÁSICAS DE DIAGNÓSTICO EN MICROBIOLOGÍA:
ÁREA BACTERIOLOGÍA.
Bqco. Fernando J. Bobadilla
Constituyen sustratos que proporcionan una mezcla equilibrada
los nutrientes requeridos y en concentraciones que permitan
un buen desarrollo del/los microorganismos para los que han
sido diseñados.
- Minerales (Na
, K
, PO
4
4-
SO
4
2-
, Ca
2+
, Fe
2+
,etc).
Fuente de carbono y
energía (ej.: glucosa).
Fuente de nitrógeno (ej.:
peptonas y aminoácidos).
Factores de crecimiento
requeridos especialmente por
algunas bacterias (ej.: NAD o
NADP).
Agente de solidificación de
ser necesario (ej.: agar-agar).
La composición exacta varía con la especie que se desee cultivar, pues las
necesidades nutricionales cambian considerablemente.
Pueden clasificarse según:
Su estado físico:
- Líquidos: permiten el crecimiento libre de MO.
Sólidos: 1,5-2% de agar.
Semisólidos: 0,3-0,5% de agar.
Su naturaleza:
Naturales: composición no exactamente conocida.
Sintéticos: composición exactamente conocida.
Semisintéticos: medios sintéticos a los que se le agrega
productos de origen natural.
Su finalidad metabólica:
Medios mínimos: base mínima. Para MO poco exigentes. También
sirven de base para otros medios. Ej.: Agar nutritivo.
Medios diferenciales e indicadores: ponen en evidencia
actividades metabólica. Ej.: CLDE.
Medios enriquecidos: a los medios mínimos se le agregan
nutrientes adicionales. Ej.: agar sangre/chocolate.
Agar nutritivo
Cistina
Lactosa
Deficiente de
Electrolitos
Agar sangre Agar chocolate
Por su uso:
Para pruebas bioquímicas: permiten la biotipificación. Ej.:
agar triplemente azucarado o TSI que permite el
reconocimiento de fermentadores de lactosa y glucosa,
producción de gas y de sulfhídrico.
Para recuento de bacterias: ej.: CLDE
Medios especiales: cumplen con las exigencias de un
determinado MO. Ej.: medio Lowestein-Jensen para
Micobacterias.
Medios de transporte: para remisión de las muestras al
laboratorio. Ej.: Stuart.
Medios de mantenimiento: permiten la viabilidad y
multiplicacion de los MO mientras se almacenan. Ej.: Caldo
tripticasa-Soya.
TSI Medio Stuart
7
Preparación de medios de cultivo
Los recipientes que se utilizarán para la preparación (matraces,
erlenmeyers) se limpian escrupulosamente, con el fin de eliminar residuos
de otras sustancias. Los pasos a seguir serán:
- Se pesa la cantidad necesaria del medio de
cultivo deshidratado y se agrega al
recipiente de preparación.
- Se añade una pequeña cantidad de agua
destilada fría y cuyo pH sea lo más cercano
al neutro. Se distribuye uniformemente por
agitación o revolviendo.
- Se añade la cantidad restante de agua
aprovechando esta adición para desprender
e incorporar al conjunto las partículas que
hubieran quedado adheridas a las paredes
internas.
- Se disuelven mediante el calentamiento a
baño María.
8
- El medio aún líquido o de nuevo disuelto, se
vierten a una temp. de se vierte 50-60°C en las cajas
de petri estériles. En caso de preparación de tubo de
agar inclinado el medio agarificado se debe pipetear
a los tubos.
- Esperar a que solidifiquen, dejar secar en estufa y,
en caso de no ser utilizados inmediatamente,
deberán ser guardados refrigerados y a oscuras.
Siempre se guardan en posición invertida.
Ciertos medios de cultivo (como los que tiene
tioglicolato) se conservan mejor a temp. ambiente.
- Deberán sacarse del refrigerador una hora antes
de su uso.