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determinar el carácter anfótero de los aminoácidos y determinar los valores de pk de los grupos ionizables
Tipo: Guías, Proyectos, Investigaciones
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Subido el 16/06/2022
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Facultad de Ciencias Agropecuarias y Recursos Naturales LABORATORIO BIOQUIMICA AMINOÁCIDOS: CURVAS DE TITULACIÓN Y SEPARACIÓN POR CROMATOGRAFÍA EN CAPA FINA PRACTICA # Luz Daniela García Parra 117004513 Juan Camilo Ordoñez Giraldo 117004525 Facultad de Ciencias Agropecuarias y Recursos Naturales. Programa Ingeniería Agroindustrial OBJETIVOS Comprobar el carácter anfotérico de los aminoácidos y determinar mediante curvas de titulación, los valores de pK de los grupos ionizables. Hallar el punto isoeléctrico de los aminoácidos. Separar e identificar una mezcla de aminoácidos por cromatografía en capa fina. RESULTADOS Glicina pH inicial 6, Tabla 1: Concentración y pH después de cada adición de HCL a la Glicina HCL (mL) Concentración pH 1 0,0019 3, 2 0,0038 3, 3 0,0056 3, 4 0,0074 3, 5 0,0090 3, 6 0,0107 3, 7 0,0122 2, 8 0,0137 2, 9 0,0152 2,
4
0 0.01 0.02 0.03 0.04 0.05 0. 0 2 4 6 8 10 12 14
Grafica 2: Concentración de NaOH en función de pH Figura 1: Camara cromatografica
Figura 2 : placa 2 Figura 3: placa 3 ANALISIS DE RESULTADOS Grafica 1 y 2 Se puede observar que el punto isoeléctrico se encuentra identificado en la gráfica 1 y 2, en la adición del mililitro 9 en la G1 y el militro 26 en la G2, que tuvo un pH de 2,8 en la G1 y de 11,19 en la G2 también se observa que antes de llegar al PI en ambas graficas el Pka1: 2,22 no influye mucho en el pH, y este sigue disminuyendo notoriamente, después de pasar el PI en el Pka2: 9,86 el pH parece no variar mucho si no que trata de mantenerse estable. Cuando el aminoácido alcanza su punto isoeléctrico este se debe a que pierde el protón del grupo amino, dando lugar a la especie deprotonada. CROMATOGRAFÍA AL: 1,0 cm fue la distancia recorrida por el soluto FASE MOVIL: corrió 4,8 cm en placa 1 Me: 1,8 cm fue la distancia recorrida por el soluto FASE MOVIL: corrió 5 cm en placa 2 Pr: 0,9 cm fue la distancia recorrida por el soluto M 2 : 0,4 cm fue la distancia recorrida por el soluto
pH entre 2,3 y 9,6 = 0 pH superiores a 9,6= -1 carga negativa solubilidad en agua de un aminoácido es mínima en su punto isoeléctrico. REFERENCIAS Enríquez, S. S., Alvarado, L. J., Díaz, C. M., & Chávez, P. H. (2014). Manual de prácticas de laboratorio de bioquímica. México D.C: Editorial McGRAW-HILL INTERAMERICANA EDITORES, S.A. de C.V. Rodwell, V., Bende, D., Botham, K., Kennelly, P., & Weil, A. (2010). BioQuímica Ilustrada, 30e. México, D.F.: Editorial Interamericana editores, S.A. de C.V. Stryer, L., Berg, J., & Tymoczko, J. (2009). BioQuímica con Aplicaciones. 7e. Barcelona, España : Editorial Reverte.